无菌室一般为4 — 5 平方米、高 2.5 米的独立小房间(与外间隔离),专辟于微生物实验室内,可以用板材和玻璃建造。无菌室外要设一个缓冲间,错开门向,以免气流带进杂菌。无菌室和缓冲间都必须密闭、室内装备的换气设备必须有空气过滤装置。在获得了无菌环境和无菌材料后,只有保持无菌状态,才能对某种特定的已知微生物进行研究。
注意事项
严格无菌操作,防止微生物污染;操作人员进入无菌室应先关掉紫外灯。
规程
1.无菌室应设有无菌操作间和缓冲间,无菌操作间洁净度应达到10000级,室内温度保持在18-24℃,湿度保持在45-65%。**净台洁净度应达到100级。
2.无菌室应保持清洁,严禁堆放杂物,以防污染。
3.严防一切灭菌器材和培养基污染,已污染者应停止使用。
4.无菌室应备有工作浓度的消毒液,如5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的新洁尔灭溶液,等等。
5.无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁,以保证无菌室的洁净度符合要求。
6.需要带入无菌室使用的仪器,器械,平皿等一切物品,均应包扎严密,并应经过适宜的方法灭菌。
7.工作人员进入无菌室前,必须用肥皂或消毒液洗手消毒,然后在缓冲间更换**工作服,鞋,帽子,口罩和手套(或用75%的乙醇再次擦拭双手),方可进入无菌室进行操作。
8.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上,并且同时打开**净台进行吹风。操作完毕,应及时清理无菌室,再用紫外灯辐照灭菌30分钟。
9.供试品在检查前,应保持外包装完整,不得开启,以防污染。检查前,用75%的酒精棉球消毒外表面。
10.每次操作过程中,均应做阴性对照,以检查无菌操作的可靠性。
11.吸取菌液时,必须用吸耳球吸取,切勿直接用口接触吸管。
12.接种针每次使用前后,必须通过火焰灼烧灭菌,待冷却后,方可接种培养物。
13.带有菌液的吸管,试管,培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒,24小时后取出冲洗。
14.凡带有活菌的物品,必须经消毒后,才能在水龙头下冲洗,严禁污染下水道。
工作人员进入无菌实验室要穿无菌衣、帽、口罩和**鞋,非工作人员不得随意进入。
.无菌室应该有工作浓度的消毒液,并配备紫外灯进行空气消毒,定期使用适宜的消毒液灭菌清洁,无菌室设计,保证无菌室的洁净度符合要求。
无菌实验室要保持清洁,严禁堆放杂物,手术无菌室,以防止污染。每天要进行湿式小扫除,无菌室,每周大扫除,药厂无菌室,每月进行空气和试验台表面的xi菌学检测,各项指标控制在标准范围内。
要防止灭菌器材和培养基污染,已污染的就要停止使用;需要带入无菌实验室的仪器、平皿等物品都要包扎严密,并采用适宜的方法灭菌;供试拼在检查前,应保持外包装完整,不得开启,以免污染,并消毒外表面。
无菌实验室要保持清洁,操作完毕后要清理无菌室,消毒、擦拭台面,不存放与实验无关的物品,再用紫外灯辐照灭菌。
通常将运行中的过滤器的仲阻力为初阻力的某一倍值时,或效率下降到初始效率的85%以下时的过滤器的积尘量,作为该过滤器的容尘量。滤材性质对容尘量影响较大。
建造条件编辑
1.无菌室应保持清洁,严禁堆放杂物,以防污染。
2.严防一切灭菌器材和培养基污染,已污染者应停止使用。
3.无菌室应备有工作浓度的消毒液,如5%的甲酚溶液,70%的酒精,0.1%的新洁尔灭溶液,等等。
4.无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁,以保证无菌室的洁净度符合要求。
5 需要带入无菌室使用的仪器,器械,平皿等一切物品,均应包扎严密,并应经过适宜的方法灭菌。
6.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上,并且同时打开**净台进行吹风。操作完毕,应及时清理无菌室,再用紫外灯辐照灭菌20分钟。
7.供试品在检查前,应保持外包装完整,不得开启,以防污染。检查前,用70%的酒精棉球消毒外表面。
8.每次操作过程中,均应做阴性对照,以检查无菌操作的可靠性。
9.吸取菌液时,必须用吸耳球吸取,切勿直接用口接触吸管。
10.接种针每次使用前后,必须通过火焰灼烧灭菌,待冷却后,方可接种培养物。
11.带有菌液的吸管,试管,培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒,24小时后取出冲洗。
12.如有菌液洒在桌上或地上,应立即用5%石碳酸溶液或3%的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟,再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时,应立即脱去,高压蒸汽灭菌后洗涤。
13.凡带有活菌的物品,必须经消毒后,才能在水龙头下冲洗,严禁污染下水道。
14.无菌室应每月检查菌落数。在**净工作台开启的状态下,取内径90mm的无菌培养皿若干,无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15ml,放至凝固后,倒置于30~35℃培养箱培养48小时,证明无菌后,取平板3~5个,分别放置工作位置的左中右等处,开盖暴露30分钟后,倒置于30~35℃培养箱培养48小时,取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得**过1个菌落,10000级洁净室平均不得**过3个菌落。如**过限度,应对无菌室进行彻底消毒,直至重复检查合乎要求为止。
空气净化编辑
无菌室空气净化工程是属于生物净化工程的一种,一般无菌室要求的洁净度为万级,标准的微生物检测实验室都会专门开辟5~8个平方出来建造无菌室,无菌室只要够放置实验室样品及必需的设备即可,面积*过大而造成浪费,面积过大对于做无菌室空气净化工程来说不仅仅是提高建造成本而已,日后的运行及维护费用也会高的令人惊讶。一般微生物检测按照实验室行业要求都需要在无菌室中进行,很多食品菌、微生物等都是在**净工作台中完成检测和化验的。
随着社会科技发展,国家越来越重视食品安全问题,无菌室空气净化工程也在不断的普及。有了无菌室净化工程,将**净工作台放置于无菌室内操作,使实验环境更加洁净,实验样品不易于被污染。
无菌室内配置了百级**净工作台也并不是所有细菌都可以进行实验的,一般常规的菌落总数、微生物培养、血细胞培养、研究、干细胞研究、大肠菌等实验可以在百级**净台进行。但是如果需要做致病细菌,为了达到保护实验室人员的安全问题,就必须得建造生物安全实验室,使用生物安全柜进行实验。该类实验不能在普通的无菌实验室中进行。