洁净室气流组织
送风气流应以较短距离,不受污染地直接送到工作区,并且尽量覆盖工作区,使污染物在扩散之前被携带到回风口。尽量减少涡流,避免把工作区以外的污染物带入工作区。尽量控制气流的上升,防止造成二次污染。工作区的气流尽量均匀。主要分为单向流洁净室(层流)及非单向流洁净室(乱流)。
建造条件编辑
1.无菌室应保持清洁,严禁堆放杂物,以防污染。
2.严防一切灭菌器材和培养基污染,已污染者应停止使用。
3.无菌室应备有工作浓度的消毒液,如5%的甲酚溶液,70%的酒精,0.1%的新洁尔灭溶液,等等。
4.无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁,以保证无菌室的洁净度符合要求。
5 需要带入无菌室使用的仪器,器械,平皿等一切物品,均应包扎严密,并应经过适宜的方法灭菌。
6.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上,并且同时打开**净台进行吹风。操作完毕,应及时清理无菌室,再用紫外灯辐照灭菌20分钟。
7.供试品在检查前,应保持外包装完整,不得开启,以防污染。检查前,用70%的酒精棉球消毒外表面。
8.每次操作过程中,均应做阴性对照,以检查无菌操作的可靠性。
9.吸取菌液时,必须用吸耳球吸取,切勿直接用口接触吸管。
10.接种针每次使用前后,必须通过火焰灼烧灭菌,待冷却后,方可接种培养物。
11.带有菌液的吸管,试管,培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒,24小时后取出冲洗。
12.如有菌液洒在桌上或地上,应立即用5%石碳酸溶液或3%的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟,再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时,应立即脱去,高压蒸汽灭菌后洗涤。
13.凡带有活菌的物品,必须经消毒后,才能在水龙头下冲洗,严禁污染下水道。
14.无菌室应每月检查菌落数。在**净工作台开启的状态下,取内径90mm的无菌培养皿若干,无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15ml,放至凝固后,倒置于30~35℃培养箱培养48小时,证明无菌后,取平板3~5个,分别放置工作位置的左中右等处,开盖暴露30分钟后,倒置于30~35℃培养箱培养48小时,取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得**过1个菌落,10000级洁净室平均不得**过3个菌落。如**过限度,应对无菌室进行彻底消毒,直至重复检查合乎要求为止。
空气净化编辑
无菌室空气净化工程是属于生物净化工程的一种,一般无菌室要求的洁净度为万级,标准的微生物检测实验室都会专门开辟5~8个平方出来建造无菌室,无菌室只要够放置实验室样品及必需的设备即可,面积*过大而造成浪费,面积过大对于做无菌室空气净化工程来说不仅仅是提高建造成本而已,日后的运行及维护费用也会高的令人惊讶。一般微生物检测按照实验室行业要求都需要在无菌室中进行,很多食品菌、微生物等都是在**净工作台中完成检测和化验的。
随着社会科技发展,国家越来越重视食品安全问题,无菌室空气净化工程也在不断的普及。有了无菌室净化工程,将**净工作台放置于无菌室内操作,使实验环境更加洁净,实验样品不易于被污染。
无菌室内配置了百级**净工作台也并不是所有细菌都可以进行实验的,一般常规的菌落总数、微生物培养、血细胞培养、研究、干细胞研究、大肠菌等实验可以在百级**净台进行。但是如果需要做致病细菌,为了达到保护实验室人员的安全问题,就必须得建造生物安全实验室,使用生物安全柜进行实验。该类实验不能在普通的无菌实验室中进行。
无菌室一般为4 — 5 平方米、高 2.5 米的独立小房间(与外间隔离),专辟于微生物实验室内,可以用板材和玻璃建造。无菌室外要设一个缓冲间,错开门向,以免气流带进杂菌。无菌室和缓冲间都必须密闭、室内装备的换气设备必须有空气过滤装置。在获得了无菌环境和无菌材料后,只有保持无菌状态,才能对某种特定的已知微生物进行研究。
注意事项
严格无菌操作,防止微生物污染;操作人员进入无菌室应先关掉紫外灯。
规程
1.无菌室应设有无菌操作间和缓冲间,无菌操作间洁净度应达到10000级,室内温度保持在18-24℃,湿度保持在45-65%。**净台洁净度应达到100级。
2.无菌室应保持清洁,严禁堆放杂物,以防污染。
3.严防一切灭菌器材和培养基污染,已污染者应停止使用。
4.无菌室应备有工作浓度的消毒液,如5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的新洁尔灭溶液,等等。
5.无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁,以保证无菌室的洁净度符合要求。
6.需要带入无菌室使用的仪器,器械,平皿等一切物品,均应包扎严密,并应经过适宜的方法灭菌。
7.工作人员进入无菌室前,必须用肥皂或消毒液洗手消毒,然后在缓冲间更换**工作服,鞋,帽子,口罩和手套(或用75%的乙醇再次擦拭双手),方可进入无菌室进行操作。
8.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上,并且同时打开**净台进行吹风。操作完毕,应及时清理无菌室,再用紫外灯辐照灭菌30分钟。
9.供试品在检查前,应保持外包装完整,不得开启,以防污染。检查前,用75%的酒精棉球消毒外表面。
10.每次操作过程中,均应做阴性对照,以检查无菌操作的可靠性。
11.吸取菌液时,必须用吸耳球吸取,切勿直接用口接触吸管。
12.接种针每次使用前后,必须通过火焰灼烧灭菌,待冷却后,方可接种培养物。
13.带有菌液的吸管,试管,培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒,24小时后取出冲洗。
14.凡带有活菌的物品,必须经消毒后,才能在水龙头下冲洗,严禁污染下水道。
无菌室的使用与管理编辑
(1) 无菌室应保持清洁整齐,室内仅存放必须的检验用具如酒精灯、酒精棉、火柴、镊子、接种针、接种环、玻璃铅笔等。&不要放与检测无关的物品
(2) 室内检验用具及凳桌等保持固定位置,不随便移动。
(3) 每2—3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作台、门、窗、桌、椅及地面,然后用3%石炭酸水溶液喷雾消毒空气,最后紫外灯杀菌半小时
(4) 定期检查室内空气无菌状况,细菌数应控制在10个以下,发现不符合要求时,应立即彻底消毒灭菌。/无菌室无菌程度的测定方法:取普通肉汤琼脂平板、改良马丁培养基平板各3个(平板直径均9厘米),置无菌室各工作位置上,开盖曝露半小时,然后倒置进行培养,测细菌总数应置37℃温箱培养48小时;测霉菌数则应置27℃温箱培养5天。细菌`霉菌总数均不得**过10个为 。
(5) 无菌室杀菌前,应将所有物品置于操作之部位(待检物例外),然后打开紫外灯杀菌30分钟,时间一到,关闭紫外灯待用
(6) 进入无菌室前,必须于缓冲间更换消毒过的工作服、工作帽及工作鞋。
(7) 操作应严格按照无菌操作规定进行,操作中少说话,不喧哗,以保持环境的无菌状态。
(8)吸取菌液时,必须用吸耳球吸取,切勿直接用口接触吸管,如吸管碰到手及其它未灭菌的物体,必须重 新 更 换 ,以 防污染 。
(9) 接种针每次使用前后,必须通过火焰燃烧灭菌,待冷却后,方可接种培养物 。
(10)带有菌液的吸管、试管等器皿应浸泡在盛有5%的来苏儿溶液的消毒桶内消毒,24h 取出冲洗;培养皿则需在高压灭菌器中重新灭菌后方可处理营养基,切记不要直接冲入下水道中,防止阻塞。如有菌液洒在桌上或地上,应立即用 5%石碳酸溶液或 3%的来苏儿倾覆在被污染处至少 30min,再做处理,工作衣帽等受到菌液污染时,应立即脱去,高压蒸汽灭菌后洗涤 。 [2]