云南无菌室通风柜

工作人员进入无菌实验室要穿无菌衣、帽、口罩和专用鞋，非工作人员不得随意进入。

.无菌室应该有工作浓度的消毒液，并配备紫外灯进行空气消毒，定期使用适宜的消毒液灭菌清洁，无菌室设计，**无菌室的洁净度符合要求。

无菌实验室要保持清洁，严禁堆放杂物，手术无菌室，以防止污染。每天要进行湿式小扫除，无菌室，每周大扫除，药厂无菌室，每月进行空气和试验台表面的xi菌学检测，各项指标控制在标准范围内。

要防止灭菌器材和培养基污染，已污染的就要停止使用；需要带入无菌实验室的仪器、平皿等物品都要包扎严密，并采用适宜的方法灭菌；供试拼在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以免污染，并消毒外表面。

无菌实验室要保持清洁，操作完毕后要清理无菌室，消毒、擦拭台面，不存放与实验无关的物品，再用紫外灯辐照灭菌。
洁净室气流组织

送风气流应以较短距离，不受污染地直接送到工作区，并且尽量覆盖工作区，使污染物在扩散之前被携带到回风口。尽量减少涡流，避免把工作区以外的污染物带入工作区。尽量控制气流的上升，防止造成二次污染。工作区的气流尽量均匀。主要分为单向流洁净室（层流）及非单向流洁净室（乱流）。



无菌室的设置

无菌室应根据既经济又科学的原则来设置。其基本要求有以下几点：

（1）无菌室应有内、外两间，内间是无菌室，外间是缓冲室。房间容积不宜过大，以便于空气灭菌。内间面积2×2.5＝5m2，外间面积1×2＝2m2，高以2.5m以下为宜，都应有天花板。

（2）内间应当设拉门，以减少空气的波动，门应设在离工作台较远的位置上；外间的门较好也用拉门，要设在距内间较远的位置上。

（3）在分隔内间与外间的墙壁或“隔扇”上，应开一个小窗，作接种过程中必要的内外传递物品的通道，以减少人员进出内间的次数，降低污染程度。小窗宽60cm、高40cm、厚30cm，内外都挂对拉的窗扇。

（4）无菌室容积小而严密，使用一段时间后，室内温度很高，故应设置通气窗。通气窗应设在内室进门处的顶棚上（即离工作台较远的位置），较好为双层结构，外层为百叶窗，内层可用抽板式窗扇。通气窗可在内室使用后、灭菌前开启，以流通空气。有条件可安装恒温恒湿机。
6、洁净室风量及气流组织

6.1、洁净室风量

洁净室风量包括送风量、回风量、排风量、新风量。

风量大小取决于洁净室等级及温湿度要求。洁净室风量根据发尘量**洁净度的风量及热湿负荷所需要的风量取其大者，往往维持洁净度的风量远大于热温湿度所需要的风量。

新风量根据人员需求风量（30~40m3/h）、维持正压风量、排风量等综合考虑。

无菌室一般为4 — 5 平方米、高 2.5 米的独立小房间（与外间隔离），专辟于微生物实验室内，可以用板材和玻璃建造。无菌室外要设一个缓冲间，错开门向，以免气流带进杂菌。无菌室和缓冲间都必须密闭、室内装备的换气设备必须有空气过滤装置。在获得了无菌环境和无菌材料后，只有保持无菌状态，才能对某种特定的已知微生物进行研究。
注意事项
严格无菌操作，防止微生物污染；操作人员进入无菌室应先关掉紫外灯。
规程
1.无菌室应设有无菌操作间和缓冲间，无菌操作间洁净度应达到10000级，室内温度保持在18-24℃，湿度保持在45-65%。**净台洁净度应达到100级。
2.无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。
3.严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应停止使用。
4.无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5%的甲酚溶液，75%的酒精，0.1%的新洁尔灭溶液，等等。
5.无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以**无菌室的洁净度符合要求。
6.需要带入无菌室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。
7.工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。
8.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开**净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌30分钟。
9.供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用75%的酒精棉球消毒外表面。
10.每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。
11.吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。
12.接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。
13.带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒，24小时后取出冲洗。
14.凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水龙头下冲洗，严禁污染下水道。
空气过滤器特性指标及分类

近年过滤器及相关配套厂商迅猛增加，市场混乱，产品质量及服务良莠不齐。洁净室从业人员必须了解过滤器的相关指标，以辨别产品的质量优劣。

（5） 无菌室杀菌前，应将所有物品置于操作之部位（待检物例外），然后打开紫外灯杀菌30分钟，时间一到，关闭紫外灯待用。
（6） 进入无菌室前，必须于缓冲间更换消毒过的工作服、工作帽及工作鞋。
（7） 操作应严格按照无菌操作规定进行，操作中少说话，不喧哗，以保持环境的无菌状态。
器材及场所的灭菌消毒
微生物检验用器材及场所必须进行灭菌或消毒处理，不同的对象采用不同的处理方法。
1． 高压蒸汽灭菌: 工作服、口罩、稀释液等，置高压杀菌锅内，一般采用121℃灭菌半小时,当然不同的培养基有不同的要求,应分别处理。
2． 火焰灭菌： 接种针、接种环等可直接火焰灭菌。
3． 高温干燥灭菌： 各种玻璃器皿、注射器、吸管等，置于燥箱中160℃灭菌2小时。
4． 一 般消毒: 无菌室内的凳、工作台、试管架、天平、待检物容器或包装均无法进行灭菌，必须用其他方法进行消毒处理，采用2%石炭酸或来苏儿水溶液擦拭消毒，工作人员的手也用此法进行消毒。
5． 空气的消毒： 开启紫外灯照射30―60分钟 即可。
准备工作
1． **行无菌室空间的消毒，开启紫外灯30―60分钟。
2． 检验用的有关器材， 搬入无菌室前必须分别进会灭菌消毒。
3． 操作人员必须将手清洗消毒，穿戴好无菌工作衣、帽和鞋，才能进入无菌室。
4． 进入无菌室后再一次消毒手部，然后才进行检验操作。


无菌室要求有哪些？
1．工作室应矮小、平整，面积只需4米2左右，高2。2—2。3米，内部装修应平整、光滑，无凹凸不平或棱角等，四壁及屋顶应用不透水之材质，便于擦洗及杀菌
2．室内采光面积大，从室外应能看到室内情况。
3．为**无菌室的洁净，无菌室周围需设缓冲走廊，走廊旁再设缓冲间，其面积可小于无菌室。
4．无菌室、缓冲走廊及缓冲间均设有日光灯及供消毒空气用紫外灯，杀菌紫外灯离工作台以1米为宜 ，其电源开关均应设在室外。
5．无菌室与缓冲间进出口应设拉门，门与窗平齐，门缝要封紧，两门应错开，以免空气对流造成污染。
6．无菌室的使用与管理
（1） 无菌室应保持清洁整齐，室内仅存放必须的检验用具如酒精灯、酒精棉、火柴、镊子、接种针、接种环、玻璃铅笔等。
&不要放与检测无关的物品
（2） 室内检验用具及凳桌等保持固定1位置，不随便移动。
（3） 每2—3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作台、门、窗、桌、椅及地面，然后用3%石炭酸水溶液喷雾消毒空气，最后紫外灯杀菌半小时

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